Electroforesis horizontal en geles de poliacrilamida en la detección y tipificación del virus de papiloma humano / Horizontal electrophoresis in polyacrylamide gels in the detection and typing of human papillomavirus

OBJETIVO: estandarizar el uso de electroforesis horizontal en poliacrilamida como un método rápido de fácil implementación y de alta sensibilidad para la detección y tipificación del virus del papiloma humano por reacción en cadena de la polimerasa-polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción con la enzima HpyCH4V como única enzima de restricción. MÉTODOS: Se utilizó el ácido desoxirribonucleico de 17 tipos de virus del papiloma humano, clonados en la colección del Laboratorio de Biología y Medicina Experimental (LABIOMEX-ULA), para la amplificación de la región flanqueada por los oligonucleótidos MY09/ MY11, los amplificados obtenidos se sometieron a digestión enzimática con la enzima HpyCH4V. El producto se corrió en geles de poliacrilamida de rápida polimerización en equipos de electroforesis horizontales. El ácido desoxirribonucleico se tiñó con bromuro de etidio y fueron fotografiados con la utilización de un trans-iluminador de luz ultravioleta. RESULTADOS: Se corrieron muestras de 17 tipos diferentes de virus del papiloma humano en geles de poliacrilamida en electroforesis horizontal sudmarina. Se observaron patrones de digestión, con la enzima de restricción HpyCH4V, bien definidos y distintos para 15 tipos diferentes. Se presentó una coincidencia de patrón polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción para los tipos 45 y 52 ambos de alto riesgo. Se obtuvo una excelente resolución en corridas de 2,5 cm de longitud para cualquier patrón polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción de los 17 tipos de virus del papiloma humano analizados. CONCLUSIÓN: El análisis de las corridas permitió una eficiente caracterización de los 17 tipos virales. La comparación del índice de movilidad relativa con polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción virtual de los fragmentos amplificados presentó diferencias mínimas, el análisis de la movilidad en agarosa y poliacrilamida se ajustaron perfectamente permitiendo la sustitución de la agarosa por la poliacrilamida.

OBJECTIVE: to standardize the use of horizontal electrophoresis in polyacrylamide as a quick method of easy implementation and high sensitivity for the detection and typing of Human Papillomavirus by PCR-FRLP with HpyCH4V enzyme as unique restriction enzyme. METHODS: DNA from 17 Human Papillomavirus types, cloned in the collection of the Laboratory of Experimental Biology and Medicine, for amplification of the region flanked by the MY09/ MY11 oligonucleotides were used, the amplified obtained were subjected to enzymatic digestion with the enzyme HpyCH4V. The product was run on polyacrylamide gels rapid polymerization horizontal electrophoresis equipment. Stained with ethidium bromide and were photographed with the use of a trans-illuminating UV. RESULTS: Samples of 17 different Human Papillomavirus types polyacrylamide gel electrophoresis were run horizontally. Digestion patterns were observed with the restriction enzyme HpyCH4V, well-defined and different for different types 15. A pattern match for RFLP types 45 and 52 both high risk presented. Excellent resolution on runs of 2.5 cm in length for any RFLP pattern of the 17 Human Papillomavirus types analyzed was obtained. CONCLUSION: The analysis of the runs allows efficient characterization of the 17 Human Papillomavirus types. Comparing the relative mobility rate with the virtual RFLP of amplified fragments present minimal differences, analyzing mobility in agarose and polyacrylamide perfectly adjusted allowing for substitution of agarose by polyacrylamide.

Deleción del brazo largo del cromosoma 4(q34 qter). Reporte del hallazgo citogenético de un caso / Deletion of the long branch of the 4(q34 qter) chromosome. Report of cytogenetic finding in one case

El síndrome de deleción del cromosoma 4q presenta un amplio rango de manifestaciones clínicas en el fenotipo, con una incidencia estimada 1:100 000 y un índice de mortalidad del 28(percent). La severidad de las malformaciones varía ampliamente y depende del tamaño y la posición de la deleción en el cromosoma. El objetivo de este trabajo es describir el hallazgo citogenético de un niño de 11 años de edad con manifestaciones clínicas severas. La muestra proviene de la consulta de genética clínica del Hospital Juan Manuel Márquez. Se realizó el cariotipo en sangre periférica utilizando la micro técnica de cultivo de linfocitos y el bandeo GTG según técnicas estandarizadas en el laboratorio de citogenética del Centro Nacional de Genética Médica. Las 15 metafases analizadas mostraron un cariotipo masculino con una deleción terminal en el brazo largo del cromosoma 4 correspondiendo a la fórmula cromosómica 46, XY, del (4) (q34→qter) según el Sistema Internacional de Nomenclatura Citogenética 2013. El estudio citogenético resultó de especial interés para la detección de un síndrome cromosómico raro…(AU)

Aneuploidías y alteraciones estructurales en pacientes con enfermedades genéticas relacionadas con el cromosoma X / Aneuploidies and structural alterations in patients with X-chromosome-related genetic diseases

Las anomalías cromosómicas sexuales son las más frecuentes al nacimiento, se estima que tienen una incidencia de 1 en 300-400 embarazos. Individuos con aberraciones cromosómicas sexuales presentan un amplio espectro en el fenotipo dependiendo del tamaño de la región del cromosoma que está involucrada en la aberración, los genes localizados en el punto de ruptura y alrededor del mismo. Este trabajo tiene como objetivo describir el hallazgo citogenético en pacientes con enfermedades genéticas asociadas a los cromosomas sexuales. Se realizaron 300 estudios cromosómicos en el Laboratorio de Citogenética del Centro Nacional de Genética Médica utilizando la microtécnica de cultivo de linfocitos con suero exógeno y bandas GTG, según técnicas estandarizadas en el laboratorio. Del total de casos estudiados, 81 (27 (percent) involucraron los cromosomas sexuales; de estos, 56 (18,6 (percent) pacientes tenían aberraciones numéricas y 25 (8,33 (percent) aberraciones estructurales. La aneuploidía 45,X en línea pura constituyó el 15 (percent), y en mosaico un 3,6 (percent). Las deleciones constituyeron la anomalía estructural más frecuente del cromosoma X…(AU)

Relación clínico-citogenética en una muestra de pacientes con síndrome Turner / Clinical-genetic relation in a sample of patients with Turner syndrome

El síndrome Turner es un trastorno causado por la ausencia completa o parcial de un segundo cromosoma sexual en mujeres. Este trabajo tuvo como objetivos describir la relación edad-fenotipo según el motivo de indicación de los casos correspondientes al síndrome Turner, analizar las frecuencias de los diferentes cariotipos encontrados en el síndrome Turner y establecer la relación sexo fenotípico - cariotipo en los casos de mosaicismo 45, X / 46, XY. Tomando en cuenta el cariotipo de 4 387 pacientes, realizado en el Laboratorio de Citogenética del Centro Nacional de Genética Médica, fueron seleccionados los casos con aberraciones de los cromosomas sexuales y analizados los que presentaron síndrome Turner y mosaicismo 45,X/ 46, XY. El cariotipo 45, X fue el que predominó; dentro de los mosaicismos, el más frecuente fue 45, X/ 46, XX. Todos los casos con anillo del X fueron mosaicos y los casos con mosaicismo 45, X/46, XY pueden presentar diferentes fenotipos sexuales. Se evidenció que la baja talla constituye un signo cardinal para el diagnóstico del síndrome, es importante pesquisar su detección precoz para brindar la posibilidad de tratamiento en la etapa adecuada…(AU)

Intracortical lesions by 3T magnetic resonance imaging and correlation with cognitive impairment in multiple sclerosis.

BACKGROUND: Accurate classification of multiple sclerosis (MS) lesions in the brain cortex may be important in understanding their impact on cognitive impairment (CI). Improved accuracy in identification/classification of cortical lesions was demonstrated in a study combining two magnetic resonance imaging (MRI) sequences: double inversion recovery (DIR) and T1-weighted phase-sensitive inversion recovery (PSIR). OBJECTIVE: To evaluate the role of intracortical lesions (IC) in MS-related CI and compare it with the role of mixed (MX), juxtacortical (JX), the sum of IC + MX and with total lesions as detected on DIR/PSIR images. Correlations between CI and brain atrophy, disease severity and disease duration were also sought. METHODS: A total of 39 patients underwent extensive neuropsychological testing and were classified into normal and impaired groups. Images were obtained on a 3T scanner and cortical lesions were assessed blind to the cognitive status of the subjects. RESULTS: Some 238 cortical lesions were identified (130 IC, 108 MX) in 82% of the patients; 39 JX lesions were also identified. Correlations between CI and MX lesions alone (p = 0.010) and with the sum of IC + MX lesions (p = 0.030) were found. A correlation between severity of CI and Expanded Disability Status Scale was also seen (p = 0.009). CONCLUSION: Cortical lesions play an important role in CI. However, our results suggest that lesions that remain contained within the cortical ribbon do not play a more important role than ones extending into the adjacent white matter; furthermore, the size of the cortical lesion, and not the tissue-specific location, may better explain their correlation with CI.

Análisis de las aberraciones cromosómicas y del motivo de indicación de este estudio en 734 pacientes / Analysis of chromosomal aberration and reason for indicating this study in 734 patients

Se reporta que el análisis del motivo de indicación de estudios cromosómicos y del tipo y frecuencia de las aberraciones cromosómicas (AC) encontradas en 734 pacientes procedentes de consultas de genética clínica, instituciones de impedidos físicos y mentales y del Registro Cubano de Malformaciones Congénitas reveló que, en el período de enero de 1985 a mayo de 1987 la frecuencia global de AC fue del 23,8 %, para el 16,2 % en el año 1985, 17,6 % en 1986 y del 35,1 % en el periodo estudiado de 1987. Se señala que el incremento se corresponde con el mayor número de pacientes estudiados con retraso mental y patrón dismórfico, en cuyo grupo la frecuencia de AC era del 55,4 %, para representar el 47,6 % al síndrome de Down y el 15,4 % a otras AC, así como a la inclusión en nuestro servicio del estudio del síndrome frágil X, que ha permitido el diagnóstico de 17 pacientes de los 48 del sexo masculino a los cuales se les hizo la indicación. El incremento de AC indica buen criterio clínico para este estudio

Análisis de las aberraciones cromosómicas y del motivo de indicación de este estudio en 734 pacientes / Analysis of chromosomal aberration and reason for indicating this study in 734 patients

Se reporta que el análisis del motivo de indicación de estudios cromosómicos y del tipo y frecuencia de las aberraciones cromosómicas (AC) encontradas en 734 pacientes procedentes de consultas de genética clínica, instituciones de impedidos físicos y mentales y del Registro Cubano de Malformaciones Congénitas reveló que, en el período de enero de 1985 a mayo de 1987 la frecuencia global de AC fue del 23,8 %, para el 16,2 % en el año 1985, 17,6 % en 1986 y del 35,1 % en el periodo estudiado de 1987. Se señala que el incremento se corresponde con el mayor número de pacientes estudiados con retraso mental y patrón dismórfico, en cuyo grupo la frecuencia de AC era del 55,4 %, para representar el 47,6 % al síndrome de Down y el 15,4 % a otras AC, así como a la inclusión en nuestro servicio del estudio del síndrome frágil X, que ha permitido el diagnóstico de 17 pacientes de los 48 del sexo masculino a los cuales se les hizo la indicación. El incremento de AC indica buen criterio clínico para este estudio